單胺氧化酶(MAO)活性檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)原理及操作步驟

　　有效期：6個(gè)月

　　儲(chǔ)存條件:2-8℃

　　推薦:若使用96孔板測(cè)定，需使用96孔UV板，推薦貨號(hào)YA0602

　　英文名稱(chēng):Monoamine Oxidase(MAO)Activity Assay Kit

　　別名:單胺氧化酶試劑盒 單胺氧化酶測(cè)試盒

　　檢測(cè)方法:微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader

　　注意：本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng)，請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說(shuō)明書(shū)操作。

　　規(guī)格:100T/96S

　　MAO(EC1.4.3.4)包括MAO-A和MAO-B，是一種結(jié)合在線粒體外膜上的黃素蛋白，可催化神經(jīng)遞質(zhì)和生物胺氧化脫氨。單胺氧化酶與機(jī)體老化有關(guān)，被認(rèn)為是衰老的標(biāo)志，其主要存在于脊椎動(dòng)物的各種器官，特別是分泌腺、腦、肝臟，在無(wú)脊椎動(dòng)物、豆類(lèi)的芽等植物中也存在催化單胺類(lèi)物質(zhì)代謝，含量較低，具有重要的生理功能。

　　MAO催化單胺類(lèi)底物脫氨生成相應(yīng)的醛，進(jìn)一步氧化成酸，底物在360nm處有特征吸收峰，通過(guò)測(cè)定360nm處光吸收下降的速率，可計(jì)算MAO活性。

　　若使用96孔板測(cè)定，需使用96孔UV板

　　產(chǎn)品說(shuō)明：

　　MAO(EC1.4.3.4)包括 MAO-A 和 MAO-B，是一種結(jié)合在線粒體外膜上的黃素蛋白，可催化神經(jīng)遞質(zhì)和生物胺氧化脫氨。單胺氧化酶與機(jī)體老化有關(guān)，被認(rèn)為是衰老的標(biāo)志，其主要存在于脊椎動(dòng)物的各種器官，特別是分泌腺、腦、肝臟，在無(wú)脊椎動(dòng)物、豆類(lèi)的芽等植物中也存在催化單胺類(lèi)物質(zhì)代謝，含量較低，具有重要的生理功能。

　　MAO 催化單胺類(lèi)底物脫氨生成相應(yīng)的醛，進(jìn)一步氧化成酸，底物在 360nm 處有特征吸收峰，通過(guò)測(cè)定 360nm處光吸收下降的速率，可計(jì)算 MAO 活性。

　　Monoamine Substrate(360nm) Acids

　　注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。

　　需自備的儀器和用品：

　　紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、低溫離心機(jī)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱中、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96 孔 UV 板、震蕩儀、蒸餾水。

　　操作步驟：

　　一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量，具體比例可以參考文獻(xiàn))

　　1、 臨用前根據(jù)實(shí)驗(yàn)用量取出部分提取液一、提取液二和試劑一置于 4℃預(yù)冷 30min。

　　2、 組織樣本：按照樣本質(zhì)量(g)：提取液一體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱(chēng)取約 0.1g 組織，加入 1mL提取液一)加入提取液一，冰浴勻漿;1000g 4℃離心 10min，取上清，將上清液轉(zhuǎn)移至預(yù)冷的離心管，于 10000g，4℃離心 30min。棄上清，沉淀中加入 1mL 預(yù)冷的提取液二，振蕩混勻，于 16000g，4℃離心 40min，棄上清，加入 1mL 試劑一，振蕩混勻，置冰上待測(cè)。

　　3、 細(xì)菌或細(xì)胞樣本：收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清，按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104 個(gè))：提取液一體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液一)加入提取液一，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 7s，總時(shí)間 3min)，1000g，4℃離心 10min，取上清，將上清液轉(zhuǎn)移至預(yù)冷的離心管，于 10000g，4℃離心 30min。棄上清，沉淀中加入 1mL 預(yù)冷的提取液二，振蕩混勻，于 16000g，4℃離心 40min，棄上清，沉淀中加入 1mL 試劑一，振蕩混勻，置冰上待測(cè)。

　　4、 血清(漿)或液體樣本：直接檢測(cè)。若溶液渾濁則離心后取上清進(jìn)行測(cè)定。

　　糖原磷酸化酶b(GPb)活性檢測(cè)試劑盒 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承：遵紀(jì)守法，嚴(yán)于律己，寬仁以待，敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn)，以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng)，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作，共創(chuàng)美好的未來(lái)。本生試劑盒