如何正確進行ELISA試劑盒的洗滌步驟?

　　ELISA試劑盒洗滌步驟操作指南?

　　一、洗滌次數與方式?

　　常規(guī)洗滌次數?

　　每次孵育(如抗原/抗體結合、酶標物反應)后需洗滌 ?3-5次?，以去除未結合物質并降低背景干擾?。

　　若背景值高，可增加至5次洗滌;若信號弱，減少至3次?。

　　洗滌方法?

　　手工洗板?：

　　每孔加入洗滌液(如PBST)至滿孔，靜置1-2分鐘，吸干后拍干?。

　　避免用力過猛，防止抗原抗體復合物脫落?。

　　洗板機洗板?：

　　確保酶標板平整，避免洗液殘留?。

　　二、關鍵操作細節(jié)?

　　洗滌液配置?

　　使用新鮮配制的洗滌液(如1×PBST)，避免放置過久產生絮狀物?。

　　若洗滌液結晶，需37℃加熱溶解后稀釋?。

　　溫度與時間控制?

　　洗滌液溫度建議保持在20-30℃，避免低溫導致“花板"現象?。

　　每次浸泡時間需≥1分鐘，確保充分洗滌?。

　　拍干技巧?

　　使用一次性吸水紙垂直拍干，避免交叉污染?。

　　酶標板拍干后需立即進行下一步操作，防止干燥導致信號減弱?。

　　三、常見問題與解決方案?

　　“花板"現象?：

　　可能原因：洗滌不凈、板不平整或孵育時間過長?。

　　解決：增加洗滌次數、檢查板平整度、控制孵育時間?。

　　高背景值?：

　　可能原因：洗滌液失效或拍干不凈?。

　　解決：更換新鮮洗滌液、需要拍干?。

　　注：以上資料僅供參考，不作為實驗依據，具體產品說明請咨詢品牌供應商或技術老師。

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